酶联免疫法检测新型除草剂双甲胺草磷

时间:2022-03-30 10:08:57 阅读:

内容摘要:摘要以甲醇与三氯硫磷为原料,人工合成了半抗原结构类似物,与琥珀酸酣反应引入羧基,利用活性酯法使之与载

摘 要 以甲醇与三氯硫磷为原料,人工合成了半抗原结构类似物,与琥珀酸酣反应引入羧基,利用活性酯法使之与载体蛋白偶联,制得完全抗原,免疫动物获得多克隆抗体,建立了新型除草剂双甲胺草磷(H-9201)的间接竞争ELISA检测方法,并进行了水体中除草剂H-9201残留的实际样品检测。结果表明: 所获得的多克隆抗体可以特异性的识别目标化合物H-9201,抗体的效价为1/102400,抗体的工作浓度为1/18000倍,抗原的工作浓度为1/512倍。在此工作浓度条件下建立的ELISA方法对H-9201的抑制中浓度(IC50)为1.331 mg/L; 检出限(IC10)为0.017 mg/L; 线性范围为0.05~20.0 mg/L。交叉反应表明,该抗体对结构类似化合物2,4-二甲基-6-硝基苯酚、硝基苯酚、甲胺磷、甲拌磷、毒死蜱、对硫磷均无识别作用;微弱识别S-羧乙基-O,O-二甲基二硫代磷酸酯、乐果、马拉硫磷;对半抗原及其结构类似物具有较高的识别作用。对田间水样的添加样本进行检测,方法的回收率范围为(80.5±4.5)%~(95.2±3.2)%,可用于水体样本中H-9201残留的ELISA检测。

关键词 除草剂; 双甲胺草磷; 酶联免疫; 多克隆抗体


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