[摘要] 目的：研究良、恶性胃病变组织表达癌胚抗原 (CEA) mRNA的差别，评估其在胃癌诊断中的应用价值。方法：以胃癌和良性胃病组织为检测标本，应用反转录套式聚合酶链反应技术检测CEA mRNA。结果：胃癌组织CEA mRNA的阳性表达率为82.4%、良性胃病组织标本为6.7%，差别有统计学意义(P<0.01)。应用CEA mRNA指标诊断胃癌的特异性为93.3%、敏感性为82.4%。结论：CEA mRNA在胃细胞恶性变时有高水平的表达，检测组织标本CEA mRNA指标诊断胃癌具有较高的应用价值。

[关键词] CEA mRNA；胃癌；胃良性病变

[中图分类号]R446[文献标识码]A [文章编号]1673-7210（2007）08（c）-016-02

Study on the different expression of carcinoembryonic antigen messenger ribonucleic acid in benign and m alignant pathological changes of gastric tissues

WANG Zhu-jun, LI Ling, SUN Bao-xin, SHEN Xing-bin, HU Jian-gong, XUE Cheng-yan

（Center Laboratory, Affiliated Hospital of Chengde Medical College, Chengde 067000，China）

[Abstract] Objective: To study the different expression of carcinoembryonic antigen messenger ribonucleic acid (CEA mRNA) in benign and m alignant gastric tissues, and acquaint the applied value of CEA mRNA in gastric tissue to diagnose gastric cancer. Methods: There were 107 patients with gastric cancer and 105 patients with gastric benign leions in the study. CEA mRNA in the specimens was detected by reverse transcriptase-nested primers-polymerase chain reaction (RT-NP-PCR), while cancer cells were detected by routine pathologic method. Results: The positive results of CEA mRNA were 82.4% in the gastric cancer tissues and were 6.7% in the gastric benign lesion tissues. The difference positive expression results of CEA mRNA were significant (P<0.01) between the gastric cancer tissues and gastric benign tissues. The specificity was 93.3% and the sensitivity was 82.4% on CEA mRNA in diagnosing gastric cancer. Conclusion: The expressional level of CEA mRNA is higher in gastric cancer tissue. CEA mRNA is a useful index in diagnosis of gastric cancer.

[Key words] Carcinoembryonic antigen mRNA; Gastric cancer; Gastric benign lesion

目前认为，细胞恶性变时相关的肿瘤特异性mRNA呈高水平表达，与检测肿瘤相关蛋白比较，检测细胞内的指导合成肿瘤相关蛋白的mRNA，对诊断与监测恶性肿瘤有更高的特异性和敏感性。癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA) mRNA是一种mRNA类肿瘤特异性标志。本研究检测良、恶性胃病变组织CEA mRNA的表达情况，旨在了解CEA mRNA在诊断与鉴别诊断胃癌方面的应用价值。

1 材料与方法

1.1 研究对象

选取212例胃病住院患者为研究对象，均经临床检查、病理学及实验室诊断、影像学诊断、介入检查和临床治疗等而确诊。其中，胃癌患者107例，男54例、女53例，年龄39～78岁，胃癌组织标本取自手术和胃镜检查活检的新鲜恶性肿瘤组织；良性病变患者105例，包括单纯胃炎37例、胃溃疡37例、胃息肉31例，男53例、女52例，年龄39～78岁，良性胃病变组织标本取自胃镜检查活检的新鲜组织。所有组织标本均有病理学诊断结论，选取病变明显组织作为检测CEA mRNA的标本。

1.2 实验方法

检测CEA mRNA应用反转录套式聚合酶链反应(RT-NP-PCR)技术，CEA mRNA套式引物序列[1]为：外套引物 a.5′-TCTGGAACTTCTCCTGGTCTCTCAGCTGG-3′，b.5′-TGTAGCTGTTGCAAATGCTTTAAGGAAGAAGC-3′；内套引物 c.5′-GGGCCACTGTCGG -CATCATGTTGG-3′，d.5′-TGTAGCTGTTGCAA ATGCTTTAAGGAAGAAGC-3′。PCR试剂由套式PCR引物、反转录酶、耐热DNA酶、DNA标准标志物(阳性对照物)、组织消化裂解液、RNA提取液、缓冲液等组成，试剂由上海复星医药股份有限公司提供。RT-NP-PCR 检测CEA mRNA操作经过消化裂解组织标本，RNA模板提取，反转录合成CEA mRNA特异的cDNA，内、外套引物PCR扩增，扩增产物检测分析等步骤，出现与阳性对照同齐的(188 bp)核酸电泳带为CEA mRNA阳性结果。

1.3 统计学方法

应用卡方检验(四格表Fisher精确概率检验法)，P<0.05差异有统计学意义。

2 结果

表1所示，胃癌组织表达CEA mRNA的阳性率远远高于良性胃病变组织，两者的差别具有统计学意义(P<0.001)。各种良性胃病变组织CEA mRNA的表达差别无统计学意义(P>0.05)，见表2。与病理学检测结果比较，本实验中CEA mRNA诊断胃癌的特异性为93.3%、敏感性为82.4%。

3 讨论

CEA mRNA是一个较新的被公认具有恶性特异性的核酸类肿瘤标志[1～5]。选择CEA mRNA 作为肿瘤标志物，始于20世纪90年代Gerhard等[1]对骨髓中肿瘤微转移的研究。CEA mRNA是指导合成癌胚抗原蛋白(CEA p)的模板，CEA mRNA与CEA p共同构成CEA mRNA-CEA p系统(简称CEA系统)，在肿瘤时呈现高度活跃表达状态[1～5]，可能与细胞识别各种生长因子受体功能相关[1～3]，而且肿瘤细胞表达CEA系统呈现非均衡性(CEA mRNA的表达活跃程度和表达量明显高于CEA)[4,5]。这种肿瘤细胞特有的表达CEA mRNA情况，是CEA mRNA作为敏感性高于CEA p的肿瘤标志物的基础。由于CEA mRNA可在多种肿瘤组织中活跃表达，且不能游离于细胞外，因此CEA mRNA是反映被检测部位存在有肿瘤细胞或某些幼变细胞的指标，可以作为肿瘤细胞存在的直接证据[1～5]。由于CEA mRNA相对含量很少且仅存在于细胞内，检测CEA mRNA常采用RT-PCR技术和必须应用有核细胞标本。在肿瘤细胞诊断学中，尤其当细胞形态学鉴别有困难时，应用RT-NP-PCR这种极高灵敏性和特异性的技术检测CEA mRNA，可以帮助发现和鉴别肿瘤细胞，提高诊断的阳性率和准确性。

本实验，发现胃癌组织中呈现高水平的CEA mRNA的表达，表达阳性率可达82.4%，远远高于良性胃病组织的表达结果；应用RT-NP-PCR检测组织标本CEA mRNA指标，诊断胃癌的特异性为93.3%，敏感性为82.4%。本组的CEA mRNA检测阳性率高于Miyazono F等[2]报道的61.9%阳性率和Kijima F等[3]报道的21.2%～36.4%阳性率，这与检测标本的不同有关。前者检测血液循环的癌细胞，后者检测转移至淋巴结中的癌细胞，本组检测胃癌组织，提示CEA mRNA的表达具有组织、器官方面的较大的差异，参照、对比、应用文献资料时需考虑此特征与差异。结果提示，检测组织标本CEA mRNA指标诊断胃癌具有很高的特异性和较高的敏感性，在病理学诊断中结合应用CEA mRNA指标有助于提高诊断的阳性率和准确性，尤其当标本质量较差、病理学诊断有困难时，检测CEA mRNA能够提供有价值的信息。关于良性胃疾病组织出现CEA mRNA阳性的情况，可能与某些再生幼稚细胞或癌前变异细胞表达CEA mRNA、标本或操作污染等有关[4,5]。对此应进一步研究，同时应进行长期随访，结合各种资料以证实原因。

[参考文献]

[1]Gerhard M, Juhl H, Kalthoff H, et al. Specific detection of carcinoembryonic antigen-expressing tumor cells in bone marrow aspirates by polymerase chain reaction[J]. J Clin Oncol, 1994, 12(4): 725-729.

[2]Miyazono F, Takao S, Natsugoe S, et al. Molecular detection of circulating cancer cells during surgery in patients with billiard-pancreatic cancer[J]. Am J Surg, 1999, 177(6): 475-479.

[3]Kilima F, Nateugoe S, takao S, et al. Detection and clinical significance of lymph node micrometastasis determined by reverse transcription-polymerase chain reaction in patients with esophageal carcinoma[J]. Oncology, 2000, 58(1): 38-44.

[4]薛承岩, 梁岩, 李桂洁. 癌胚抗原mRNA在消化系统肿瘤时表达情况的观察[J]. 世界华人消化杂志, 2000, 8(9): 59.

[5]薛承岩, 梁岩, 孙宝信, 等. 消化道恶性肿瘤组织癌胚抗原mRNA表达情况的检测[J]. 中国癌症杂志, 2001, 11(3): 259-261.

（收稿日期：2007-07-11）

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